MO25 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404607

개요

CAB39는 STRAD 가짜키나아제(pseudokinase)와 함께 LKB1(STK11) 종양억제 키나아제 복합체를 안정화하고 활성화하는, 보존된 스캐폴드 단백질 MO25를 암호화합니다. 이 복합체를 통해 MO25는 AMPK 계열 키나아제의 인산화를 지원하여, 세포의 에너지 상태를 대사 조절, 세포 극성, 스트레스 반응, 성장 조절을 제어하는 경로들과 연결합니다. MO25 의존적 신호전달은 상피 조직화와 세포골격 역학에 영향을 미치며, 이러한 과정은 암 생물학 및 대사 기능 이상 모델에서 흔히 교란됩니다. 따라서 LKB1–STRAD–MO25 축의 활성 변화는 증식 조절, 영양분 감지, 그리고 극성과 연관된 표현형을 연구하는 데 중요합니다.

MO25 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CAB39 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CAB39 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CAB39의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MO25 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MO25 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CAB39 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MO25 기능에 중요한 CAB39 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CAB39 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MO25 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 MO25 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CAB39 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MO25 HDR 플라스미드 (h) 및 MO25 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CAB39 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CAB39 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.