MCAD CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-418938

개요

Acadm은 중쇄 아실-CoA 탈수소효소(MCAD)를 암호화하며, MCAD는 미토콘드리아의 플라보단백질로서 중쇄 지방산의 β-산화에서 첫 번째 탈수소화 단계를 촉매합니다. 이를 통해 지질 분해 대사를 세포의 ATP 생성과 산화환원 균형과 연결합니다. MCAD 활성은 금식이나 높은 에너지 요구 상황에서 아세틸-CoA 공급 및 ETF/ETFDH를 통한 전자 전달을 통해 TCA 회로와 산화적 인산화를 구동함으로써 대사적 유연성을 뒷받침합니다. Acadm이 교란되면 미토콘드리아 지방산 산화가 흐트러지고 아실카르니틴 프로파일이 변화하며, 산화 스트레스 반응과 지질 신호전달 네트워크에도 이차적인 영향을 유발할 수 있습니다. MCAD 결핍은 지방산 이용 장애와 관련된 잘 확립된 선천성 대사이상으로, Acadm은 마우스 모델에서 미토콘드리아 대사 항상성을 연구하는 데 중요한 표적으로 여겨집니다.

MCAD CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Acadm 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Acadm 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Acadm의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MCAD 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MCAD 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Acadm 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MCAD 기능에 중요한 Acadm 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Acadm 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MCAD CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 MCAD CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Acadm 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MCAD HDR 플라스미드 (m) 및 MCAD HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Acadm 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Acadm 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.