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Plasmid-Vektoren, die zur Expression codierender Regionen eukaryotischer Gene in bakteriellen, insekten- und mammalianen Wirtszellen verwendet werden, sind weit verbreitet; solche Expression-Vektoren codieren häufig Hybrid-Fusionsproteine, die zum Teil aus prokaryotischen und zum Teil aus eukaryotischen Proteinen bestehen. Ein solches System nutzt Maltose-Bindungsprotein (MBP), das 370 Aminosäure-Produkt des E. coli mal E Gens. Plasmid-Vektoren wurden mit dem MBP-Domain konstruiert, die es ermöglichen, hohe Mengen an MBP-Fusionsproteinen herzustellen, die in einem Schritt durch Affinitätschromatographie an kreuzverlinktem Amylose-Harz aufgereinigt werden können. Sobald es an Amylose gebunden ist, kann das MBP-Protein vom Zielprotein durch Kallikrein-Faktor Xa an einer spezifischen Vier-Reste-Stelle getrennt werden. Alternativ kann das intakte Fusionsprotein durch Zugabe von überschüssigem freiem Maltose spezifisch von dem Harz eluiert werden. Nach der Elution kann das MBP-Fusionsprotein entweder durch Western-Blot-Analyse oder Immunpräzipitation mit Antikörpern, die spezifisch für das MBP-Tag sind, visualisiert werden. Expression-Systeme, die das MBP-Fusionstag nutzen, umfassen die pCG-806fx- und pMal-Vektoren.
Alexa Fluor® ist ein Markenzeichen von Molecular Probes Inc., OR., USA
LI-COR® und Odyssey® sind Markenzeichen von LI-COR Biosciences
Bestellinformation
Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MBP-probe Antikörper (R3.2) | sc-53366 | 200 µg/ml | $316.00 | |||
MBP-probe (R3.2): m-IgG Fc BP-HRP Bundle | sc-536947 | 200 µg Ab; 10 µg BP | $354.00 | |||
MBP-probe (R3.2): m-IgGκ BP-HRP Bundle | sc-534124 | 200 µg Ab; 40 µg BP | $354.00 |