IL-31 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410448
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-31 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IL-31, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-31 Anticorpo (E-2): sc-515415
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-31 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-410448 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A IL31 humana codifica a interleucina-31 (IL-31), uma citocina derivada de células T que sinaliza por meio de um complexo receptor heterodimérico (IL31RA e OSMR) para ativar as vias JAK/STAT, MAPK/ERK e PI3K/AKT. A IL-31 modula respostas de células epiteliais e estromais, moldando a produção de quimiocinas, a inflamação da barreira e a comunicação neuroimune que contribui para o prurido e a remodelação tecidual. A sinalização desregulada de IL-31 tem sido associada a doenças inflamatórias da pele e à inflamação alérgica das vias aéreas, e é estudada como um mediador que conecta a imunidade do tipo 2 ao prurido e a circuitos inflamatórios crônicos. Essas propriedades tornam a IL31 um alvo relevante para estudos mecanísticos de sinalização induzida por citocinas, “cross-talk” entre receptores e interações imune–epiteliais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IL-31 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene IL31 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do IL31, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do IL31 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IL-31.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de IL31 para a investigação da sinalização de IL-31, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) IL31 críticos para a função IL-31
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos IL31 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IL-31 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo IL-31 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus IL31. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IL-31 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR IL-31 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia IL31 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo IL31 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.