HMGI-C Lentiviral Activation Particles (m): sc-420880-LAC

Das murine Gen Hmga2 kodiert das architektonische Chromatinprotein HMGI-C, einen Nicht-Histon-Faktor, der an AT-reiche DNA bindet und die Assemblierung des Enhanceosoms moduliert, um Transkriptionsprogramme zu beeinflussen, die Proliferation, Linienfestlegung (Lineage Commitment) und das Entwicklungs‑Timing steuern. HMGI-C ist in Netzwerke des Chromatin-Remodelings und von Transkriptionsfaktoren eingebunden und justiert dadurch Zellzyklusprogression, epithelial–mesenchymale Plastizität sowie die Selbsterneuerung von Stamm-/Vorläuferzellen. Eine dysregulierte Hmga2-Expression wird mit veränderter Wachstumskontrolle und Differenzierungszuständen in Verbindung gebracht, weshalb es als häufig genutzter molekularer Knotenpunkt zur Untersuchung entwicklungsbezogener Genregulation und onkogener Transkriptionsschaltkreise dient. In Mausmodellen fungiert Hmga2 als gut handhabbarer Regulator von Veränderungen der Genomarchitektur, die Transformation, Geweberegeneration und zelluläre Reprogrammierung begleiten.

HMGI-C Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Hmga2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

HMGI-C Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Hmga2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen HMGI-C-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Hmga2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.