Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Gα 11: sc-401653-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Gα 11 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Gα 11 Double Nickase (h) et le plasmide Gα 11 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GNA11. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Gα 11 Antibody (D-6): sc-390382
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Gα 11 | sc-401653-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Gα 11 | sc-401653-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GNA11 code la sous-unité α Gα11 de la protéine G hétérotrimérique humaine, un transducteur clé de la signalisation des GPCR couplés à Gq/11 à la membrane plasmique. Lors de l’activation du récepteur, Gα11 stimule la phospholipase C-β, augmentant les niveaux d’IP3 et de DAG, ce qui entraîne la mobilisation du Ca2+ intracellulaire et l’activation de la protéine kinase C, avec des effets en aval sur la voie MAPK et d’autres voies de seconds messagers. Cet axe de signalisation régule la prolifération, la sécrétion, la dynamique du cytosquelette et la désensibilisation des récepteurs dans divers types cellulaires. Une activité dérégulée de GNA11 a été associée à une signalisation oncogénique ainsi qu’à des altérations de la biologie endocrine et mélanocytaire, ce qui en fait un nœud pertinent pour la dissection des voies dans des modèles liés aux maladies.
Gα 11 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GNA11 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GNA11. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GNA11. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GNA11.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.