Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
CPOX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419785
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CPOX O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CPOX, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CPOX Anticorpo (B-9): sc-393388
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CPOX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419785 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cpox codifica a coproporfirinogênio oxidase (CPOX), uma enzima mitocondrial que catalisa a descarboxilação oxidativa do coproporfirinogênio III em protoporfirinogênio IX na via de biossíntese do heme. Essa etapa é essencial para a disponibilidade celular de heme, que sustenta a montagem de hemoproteínas, o metabolismo oxidativo e a homeostase redox, particularmente em tecidos metabolicamente ativos. A disrupção de enzimas da via do heme pode comprometer a função mitocondrial, induzir o acúmulo de intermediários porfirínicos e alterar respostas ao estresse oxidativo. Assim, Cpox é relevante para estudos de metabolismo de porfirinas, biologia mitocondrial e mecanismos subjacentes a fenótipos do tipo porfiria em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CPOX (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cpox em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cpox, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cpox na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CPOX.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cpox para a investigação da sinalização de CPOX, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cpox críticos para a função CPOX
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cpox para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CPOX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CPOX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cpox. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CPOX Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CPOX (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cpox para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cpox definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.