COMMD1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-404544

Panoramica

COMMD1 (proteina 1 contenente il dominio MURR1 del metabolismo del rame) è una proteina adattatrice multifunzionale che regola la segnalazione dipendente dall’ubiquitina e il traffico di membrana, con ruoli di rilievo nell’omeostasi del rame e nel turnover intracellulare delle proteine. Modula l’attività trascrizionale di NF-κB influenzando la stabilità e la dinamica nucleare dei componenti chiave della via, incidendo così sui programmi infiammatori e di risposta allo stress. COMMD1 interagisce inoltre con i macchinari di smistamento endosomiale e con i processi di trasporto ionico, contribuendo alla fisiologia epiteliale ed epatica. Alterazioni della funzione di COMMD1 sono state associate a una gestione disfunzionale dei metalli, a una maggiore suscettibilità allo stress ossidativo e a una segnalazione infiammatoria aberrante, aspetti rilevanti per studi di biologia del fegato, stress metabolico e reti di segnalazione associate al cancro.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO COMMD1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene COMMD1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del COMMD1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto COMMD1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina COMMD1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di COMMD1 per lo studio della segnalazione di COMMD1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni COMMD1 critici per la funzione di COMMD1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di COMMD1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal COMMD1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal COMMD1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus COMMD1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal COMMD1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR COMMD1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia COMMD1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio COMMD1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.