Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD79A Double Nickase Plasmid (h): sc-401827-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CD79A Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CD79A Double-Nickase-Plasmid (h) und CD79A Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CD79A abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: CD79A: sc-20064
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CD79A Double Nickase Plasmid (h) | sc-401827-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD79A Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401827-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD79A kodiert die Ig-α‑Untereinheit des B‑Zell‑Antigenrezeptor(BCR)-Komplexes und bildet zusammen mit CD79B ein Signalübertragungs‑Heterodimer, das die Antigenbindung an intrazelluläre Aktivierungskaskaden koppelt. Über seine immunorezeptor‑tyrosinbasierten Aktivierungsmotive (ITAMs) unterstützt CD79A die phosphorylierungsabhängige Rekrutierung von SYK und die Weiterleitung nachgeschalteter Signalwege, darunter PI3K–AKT, NF‑κB und MAPK, und prägt damit Entwicklung, Aktivierung und Überleben von B‑Zellen. Eine veränderte CD79A‑Expression oder Signalgebungskompetenz ist mit fehlregulierten BCR‑Signalnetzwerken assoziiert, die an B‑Zell‑Immundefizienzen und der Biologie maligner B‑Zell‑Erkrankungen beteiligt sind. Als linienrestriktiver Marker wird CD79A zudem широко eingesetzt, um B‑Zell‑Identität, Differenzierungszustände und antigengetriebene Signalantworten in humanen Immunmodellen zu untersuchen.
CD79A Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CD79A-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CD79A abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CD79A-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CD79A-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.