ACTC1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418966

Descripción general

Actc1 codifica la actina alfa cardíaca (ACTC1), un componente principal del filamento delgado sarcomérico que se polimeriza en F-actina y sostiene la generación de fuerza en el músculo estriado. ACTC1 se coordina con la miosina, la tropomiosina y el complejo de troponina para regular la contracción dependiente de Ca2+, contribuyendo al ensamblaje de las miofibrillas, la organización del sarcómero y la mecanotransducción del citoesqueleto. En el ratón, Actc1 es muy relevante para el desarrollo y la remodelación del músculo cardíaco y esquelético, al vincular la dinámica de los filamentos de actina con vías que gobiernan la contractilidad, la estructura celular y las respuestas al estrés. La alteración genética y funcional de ACTC1 se asocia con fenotipos relacionados con cardiomiopatías y con una función muscular anómala, lo que lo convierte en un nodo útil para estudiar cambios relevantes para la enfermedad en la integridad del sarcómero y la fisiología cardíaca.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ACTC1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Actc1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Actc1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Actc1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ACTC1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Actc1 para la investigación de la señalización de ACTC1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Actc1 críticos para la función de ACTC1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Actc1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ACTC1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ACTC1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Actc1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ACTC1 (m) y el plásmido HDR ACTC1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Actc1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Actc1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.