RISC アクチベーター

4-ヒドロキシフェニルレチナミドは、合成レチノイドとしてレチノイド受容体と相互作用し、遺伝子発現を調節することで、TIG1の発現を誘導する。この相互作用により、がん細胞におけるアポトーシスと細胞周期停止を促進するシグナル伝達経路が活性化され、TIG1がこれらのプロセスの仲介物質として位置づけられる。

マグネシウムイオンは、RISCのRNA切断活性に不可欠です。マグネシウムイオンは、複合体内のRNA二重鎖の三次構造を安定化させ、RISCの主要構成要素であるアルゴナウテタンパク質のエンドヌクレアーゼ活性の補因子として作用します。

塩化カリウムはRISCの静電環境に影響を与え、RNA分子との相互作用を改善します。カリウムイオンの存在はRISCの構造安定性を高め、RNAサイレンシング活性を促進します。

アデノシン三リン酸（ATP）は、RNA 二重鎖のRISC ローディングに関連するヘリカーゼ活性に必要なエネルギーを供給する。このエネルギーは、RNA 鎖をほどくために必要であり、RISC が標的mRNA へと複合体を導く一本鎖RNA を組み込むことを可能にする。

グアノシン三リン酸（GTP）は、RISCのタンパク質成分の一部に関連するGTPアーゼ活性の基質として利用される。GTP が GDP に加水分解されると、RISC 複合体の構造変化に必要なエネルギーが供給され、RNA 分子の結合と処理能力が高まります。

カコジル酸はpHを緩衝し、in vitroにおけるRISCの安定性を維持します。これは、その最適な活性に不可欠です。 この緩衝剤は、反応条件下で複合体の構造的完全性を維持することで、RISCのRNA干渉活性を高めることができます。

塩化マンガンは、RISC内のアルゴナウテタンタンパク質の触媒活性を高める補因子です。マンガンイオンはRNAのコンフォメーションにも影響を及ぼし、RISCとRNA基質間の相互作用を改善する可能性があります。

トリス塩酸バッファーは、RISC 活性に最適な pH を確保し、RNA 干渉の効率を高めます。このバッファーは、RISC 構成要素を変性から保護し、RNA の結合と切断に必要な構造的柔軟性を維持します。

β-メルカプトエタノールは、DTTと同様の還元剤として働き、RISCにおけるアルゴナウテタンパク質の活性部位の構造を維持します。酸化損傷を防ぐことで、RISCの構造的完全性を維持し、RNA誘導性遺伝子サイレンシングを誘導する能力を高めます。

Tween-20は、低濃度で使用できる非イオン性界面活性剤であり、RISCのタンパク質成分の非特異的凝集を防止することで、RISCを安定化します。RISCの溶解性を維持することで、Tween-20は、この複合体が活性を維持し、RNAと結合できる状態を確保します。