2610044O15Rik Attivatori

I comuni attivatori 2610044O15Rik includono, ma non solo, la forskolina CAS 66575-29-9, l'8-bromoadenosina 3',5'-monofosfato ciclico CAS 76939-46-3, il Rolipram CAS 61413-54-5, l'IBMX CAS 28822-58-4 e l'Adenosina 3',5'-monofosfato ciclico CAS 60-92-4.

I composti chimici identificati come attivatori di 2610044O15Rik sono una classe distinta in grado di aumentare l'espressione del gene 2610044O15Rik in un ambiente cellulare. Il processo di scoperta di questi attivatori prevede in genere un protocollo di screening ad alto rendimento (HTS), che è un metodo efficiente per setacciare grandi librerie di sostanze chimiche per trovare quelle con un'attività biologica specifica. La pietra miliare di questa tecnica di screening è un saggio del gene reporter sensibile all'attivazione del promotore del gene 2610044O15Rik. Questo sistema di saggio integra un gene reporter, che potrebbe codificare un marcatore fluorescente o chemiluminescente, sotto la sequenza regolatrice del gene 2610044O15Rik. L'attivazione del promotore da parte di un composto chimico determina l'espressione del reporter e questo evento è contrassegnato da un segnale misurabile. Una volta che i potenziali attivatori di 2610044O15Rik sono stati identificati tramite HTS, sono stati sottoposti a una rigorosa convalida per confermare le loro capacità di attivazione del gene. Un metodo fondamentale utilizzato in questo processo di validazione è la reazione a catena della polimerasi quantitativa (qPCR), che quantifica l'espressione dell'mRNA del gene 2610044O15Rik dopo l'applicazione del composto. Un aumento dei livelli di mRNA, rispetto ai controlli non trattati, indicherebbe che il composto può effettivamente stimolare l'espressione genica a livello trascrizionale. Per determinare se questa upregulation a livello di mRNA si traduce in un aumento della proteina codificata dal gene, si ricorre all'analisi Western blot. Questa procedura prevede la separazione delle proteine mediante elettroforesi su gel, il loro successivo trasferimento su una membrana e la rilevazione mediante anticorpi specifici contro la proteina bersaglio di 2610044O15Rik. Un composto che mostra costantemente la capacità di aumentare i livelli di mRNA e di proteine rispetto ai controlli è confermato come attivatore.