ZCCHC3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426824

Descripción general

Zcchc3 codifica ZCCHC3, una proteína con dedo de zinc tipo CCCH implicada en la detección citosólica de ácidos nucleicos y en la regulación de la señalización inmunitaria innata. Las funciones descritas vinculan a ZCCHC3 con vías de defensa antiviral, incluida la modulación de respuestas asociadas a RIG-I/MDA5 y a cGAS–STING, que determinan programas de genes de interferón de tipo I e inflamación. Al influir en la señalización desencadenada por ARN/ADN y en las salidas transcripcionales aguas abajo, ZCCHC3 puede afectar las respuestas celulares frente a la infección y el estrés inmunitario. La desregulación de estos procesos es relevante para estudios de fenotipos inflamatorios e interacciones huésped–patógeno en modelos murinos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZCCHC3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Zcchc3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Zcchc3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Zcchc3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZCCHC3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Zcchc3 para la investigación de la señalización de ZCCHC3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Zcchc3 críticos para la función de ZCCHC3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Zcchc3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ZCCHC3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ZCCHC3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Zcchc3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZCCHC3 (m) y el plásmido HDR ZCCHC3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Zcchc3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Zcchc3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.