USP28 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433446
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- USP28 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico USP28, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
USP28 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-433446 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Usp28 codifica a peptidase específica de ubiquitina 28 (USP28), uma enzima desubiquitinante que edita cadeias de ubiquitina para regular a estabilidade e a degradação de proteínas. A USP28 participa de processos de controle de qualidade e de sinalização dependentes de ubiquitina, que influenciam as respostas a danos no DNA, a progressão do ciclo celular e programas transcricionais, ao controlar a abundância de fatores regulatórios-chave. Por meio dessas atividades, a USP28 é estudada em vias relacionadas à estabilidade do genoma, à sinalização de estresse e à proteostase. Alterações na função da USP28 têm sido associadas à proliferação desregulada e a contextos de sinalização oncogênica, tornando-a relevante para estudos mecanísticos em biologia do câncer e em modelos celulares relacionados.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO USP28 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Usp28 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Usp28, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Usp28 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína USP28.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Usp28 para a investigação da sinalização de USP28, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Usp28 críticos para a função USP28
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Usp28 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo USP28 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo USP28 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Usp28. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo USP28 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR USP28 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Usp28 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Usp28 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.