USP14 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-425567

개요

Usp14는 유비퀴틴 특이적 펩티다아제 14(USP14)를 암호화하며, USP14는 유비퀴틴 사슬을 절단(트리밍)하고 26S 프로테아좀에서 기질 처리 과정을 조절하는 프로테아좀 결합 탈유비퀴틴화 효소입니다. USP14는 유비퀴틴 재활용과 단백질 턴오버를 조절함으로써 단백질 항상성(proteostasis), 스트레스 반응, 그리고 유비퀴틴 의존적 분해와 연계된 신호 출력에 영향을 미칩니다. 마우스 세포에서 USP14 활성의 변화는 신경세포 유지와 시냅스 기능의 교란과 연관되어 왔는데, 이는 신경생물학에서 균형 잡힌 프로테아좀 역학이 중요하다는 점과도 일치합니다. 또한 USP14는 단백질 품질 관리와 세포 항상성을 조절하는 경로들과도 교차하므로, 유비퀴틴–프로테아좀 시스템 기능 이상에 대한 기전 연구에서 중요한 표적입니다.

USP14 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Usp14 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Usp14 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Usp14의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 USP14 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 USP14 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Usp14 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• USP14 기능에 중요한 Usp14 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Usp14 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• USP14 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 USP14 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Usp14 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  USP14 HDR 플라스미드 (m) 및 USP14 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Usp14 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Usp14 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.