tsg 101 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400290-LAC

TSG101 (Tumorsuszeptibilitätsgen 101) kodiert tsg101, eine zentrale Komponente des ESCRT‑I‑Komplexes, die ubiquitinierte Fracht erkennt und die endosomale Sortierung, die Biogenese multivesikulärer Körper (MVBs) sowie den lysosomalen Abbau koordiniert. Über ESCRT‑abhängiges Membran‑Remodeling unterstützt TSG101 außerdem die Abtrennung (Abszission) während der Zytokinese und trägt zur Reparatur der Plasmamembran sowie zum autophagiebezogenen Transport bei. Diese Aktivitäten überschneiden sich mit Prozessen der Rezeptor‑Herunterregulation, Signalterminierung und Proteostase, die Zellwachstum und Stressantworten beeinflussen. Eine dysregulierte TSG101‑Expression oder ESCRT‑Funktion wird häufig in der Krebsbiologie sowie in Wirt‑Pathogen‑Interaktionen untersucht, bei denen Membranabschnürung und Vesikeltransport gestört sind.

tsg 101 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente TSG101-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

tsg 101 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der TSG101-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen tsg 101-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen TSG101-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.