Plasmide Double Nickase (h) transgelin: sc-401343-NIC

TAGLN code pour la transgéline, une protéine se liant à l’actine, enrichie dans le muscle lisse et les cellules de type myofibroblastique, qui stabilise l’actine filamentaire et soutient l’architecture contractile. La transgéline participe au remodelage du cytosquelette, à la régulation de la forme cellulaire et aux programmes de motilité en aval de RhoA/ROCK et d’autres voies de dynamique de l’actine, influençant l’adhérence et les interactions avec la matrice extracellulaire. Une expression altérée de TAGLN est fréquemment utilisée comme marqueur de différenciation du muscle lisse et de changement phénotypique, et a été associée à des modifications du remodelage tissulaire et de la biologie tumeur–stroma dans de multiples contextes. Ces caractéristiques font de TAGLN une cible pratique pour analyser comment l’organisation de l’actine et la contractilité contrôlent la migration cellulaire, la mécanotransduction et des programmes géniques associés à des lignages cellulaires.

transgelin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TAGLN dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TAGLN. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TAGLN. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TAGLN.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.