Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Tak1 Plasmide Double Nickase (m): sc-424044-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Tak1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Tak1 Double Nickase Plasmid (m) e il Tak1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Map3k7. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Tak1 Antibody (C-9): sc-7967
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Tak1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-424044-NIC | 20 µg | $410.00 |
Mouse Map3k7 codifica TAK1 (TGF-β-activated kinase 1), una MAP3K che integra segnali provenienti da citochine pro-infiammatorie e da recettori di riconoscimento di pattern per controllare programmi trascrizionali responsivi allo stress. TAK1 è un nodo centrale che collega adattatori a monte, come le proteine TAB e i complessi TRAF, all’attivazione delle vie NF-κB, JNK e p38 MAPK, regolando così la segnalazione dell’immunità innata, la sopravvivenza cellulare, l’apoptosi e la differenziazione. Nei modelli sperimentali, la perturbazione di Map3k7 rimodella le risposte infiammatorie, l’omeostasi epiteliale e stromale e il rimodellamento tissutale, rendendolo rilevante per studi su disregolazione immunitaria, fibrosi e contesti di segnalazione oncogenica. La sua posizione nella via lo rende inoltre utile per analizzare il crosstalk tra i moduli di segnalazione TGF-β, TNF, IL-1 e TLR.
Tak1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Map3k7 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Map3k7. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Map3k7. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Map3k7 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.