STC1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-423182-LAC

Maus-Stanniocalcin 1 (Stc1) kodiert das sekretierte Glykoprotein STC1, einen pleiotropen, hormonähnlichen Faktor, der an der Homöostase von Calcium und Phosphat sowie an breit angelegten, stressadaptiven Signalwegen beteiligt ist. STC1 beeinflusst den Zellstoffwechsel, das Redox-Gleichgewicht und die mitochondriale Funktion und wurde mit Signalwegen in Verbindung gebracht, die Proliferation, Apoptose, angiogene Programme und Entzündungsreaktionen steuern. In verschiedenen Geweben wird die STC1-Expression durch Hypoxie- und Wachstumsfaktor-Signale moduliert und kann die Zell-Zell-Kommunikation innerhalb von Mikroumgebungen neu ausrichten. Eine dysregulierte STC1-Expression wurde mit Phänotypen assoziiert, die für die Krebsbiologie, ischämische Schäden, Fibrose und immunvermittelte Krankheitskontexte relevant sind, was Stc1 zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien macht.

STC1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Stc1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

STC1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Stc1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen STC1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Stc1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.