SmcY Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-403217-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SmcY O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SmcY, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SmcY Anticorpo (4C6): sc-293280
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SmcY Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-403217-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
KDM5D codifica a desmetilase de lisina SmcY, ligada ao cromossomo Y, uma enzima com domínio JmjC que remove as marcas H3K4me3/me2 para regular programas de transcrição e a acessibilidade da cromatina. Ao remodelar a metilação de histonas associada a promotores, a SmcY contribui para o controle epigenético de transições de estado celular, para a expressão gênica restrita a determinadas linhagens e para a coordenação de processos dependentes de molde de DNA, como replicação e reparo. Variações ou desregulação da atividade da família KDM5 têm sido associadas a fenótipos de diferenciação e proliferação alterados, e o KDM5D é frequentemente estudado no contexto da regulação gênica específica do sexo masculino e das contribuições ligadas ao Y para a biologia de doenças. Como modificador epigenético, a SmcY oferece um ponto de entrada acessível para dissecar como a dinâmica de metilação de histonas influencia saídas de sinalização e a regulação do genoma em células humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SmcY (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KDM5D em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KDM5D, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KDM5D na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SmcY.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KDM5D para a investigação da sinalização de SmcY, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KDM5D críticos para a função SmcY
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KDM5D para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SmcY Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SmcY Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KDM5D. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SmcY Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SmcY (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KDM5D para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KDM5D definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.