SLMAP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-429965-KO-2

Descripción general

Slmap codifica la proteína asociada al sarcolema (SLMAP), una proteína de membrana con anclaje C‑terminal, enriquecida en membranas intracelulares, incluido el sarcolema, el retículo endoplásmico y la envoltura nuclear. SLMAP participa en la organización y el tráfico de membranas, la señalización en uniones y el acoplamiento al citoesqueleto, y se ha implicado en la regulación de la función del centrosoma y la progresión del ciclo celular. En tejidos excitables, SLMAP se asocia a microdominios de canales iónicos y manejo de calcio que sustentan la actividad eléctrica y la homeostasis contráctil. La alteración de la expresión o la localización de SLMAP se ha relacionado con fenotipos de conducción cardíaca y mecanismos vinculados a la cardiomiopatía, lo que la hace relevante para estudios de arquitectura de membrana y electrofisiología.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SLMAP (m2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Slmap en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Slmap junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Slmap tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SLMAP.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Slmap para la investigación de la señalización de SLMAP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Slmap críticos para la función de SLMAP
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Slmap para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SLMAP CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SLMAP CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Slmap. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SLMAP (m) y el plásmido HDR SLMAP (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Slmap para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Slmap definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.