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Slfn11慢病毒激活颗粒(h) | sc-401137-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 SLFN11 基因编码 Schlafen 家族成员 11(Slfn11)。Slfn11 是一种与 DNA 损伤应答相关的因子,会影响细胞对复制压力的耐受性,以及在遭受遗传毒性打击后的细胞命运。SLFN11 与停滞复制叉的调控、转录–复制冲突以及检查点信号传导有关,并与决定 S 期进程和维持基因组完整性的通路相互整合。通过影响与染色质相关的过程及应激响应型转录程序,SLFN11 能够调节细胞对诱导 DNA 损伤药物的敏感性。在肿瘤生物学研究以及以 DNA 损伤为靶点的研究模型中解释耐药表型的机制时,人们也对 SLFN11 表达或功能的改变进行了广泛探讨。
Slfn11 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 SLFN11 表达。
Slfn11 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在SLFN11转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Slfn11表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 SLFN11 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。