Partículas Lentivirales de Activación (h) S-100A5: sc-418401-LAC

El gen humano **S100A5** codifica la proteína **S-100A5**, una proteína de unión a Ca2+ con motivo EF-hand de la familia S100 que actúa como sensor de calcio para modular las interacciones proteína–proteína y la señalización dependiente del estado celular. S-100A5 se ha relacionado con procesos regulados por calcio, como la organización del citoesqueleto, la dinámica de membrana y las respuestas transcripcionales, en consonancia con la participación más amplia de las proteínas S100 en la biología neuronal y epitelial. Los patrones alterados de expresión de la familia S100 se han asociado con señalización relacionada con la inflamación y con vías relevantes para el cáncer, como MAPK y NF-κB, lo que convierte a S100A5 en un marcador útil y en un nodo mecanístico para estudios de respuestas celulares al estrés y programas de diferenciación. Su expresión dependiente del contexto respalda aplicaciones para investigar la especificación de linaje, la integración de señales y la reconfiguración de vías en modelos relevantes de enfermedad.

Las partículas de activación lentiviral S-100A5 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de S100A5 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral S-100A5 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción S100A5, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de S-100A5. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo S100A5 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.