Rab 27b Plasmídeo duplo de Nickase (m2): sc-429802-NIC-2
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rab 27bO plasmídeo de dupla Nickase (m2) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rab 27b (m2) e o Plasmídeo Double Nickase Rab 27b (m22) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Rab27b. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rab 27b Anticorpo (1596CT245.254.49): sc-517602
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rab 27b Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-429802-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Rab27b de camundongo codifica a pequena GTPase Rab27b, membro da superfamília Ras que regula o tráfego vesicular ao controlar o acoplamento (docking) e a exocitose de grânulos secretórios e de organelas relacionadas a endossomos por meio de interações com efetores como proteínas da família Slp/Slac2 e motores de miosina. A atividade de Rab27b contribui para a secreção regulada, para a dinâmica de organelas relacionadas a lisossomos e para a coordenação do citoesqueleto, sustentando processos como a liberação de grânulos densos de plaquetas, a degranulação de neutrófilos e a função secretória epitelial. A desregulação do tráfego dependente de Rab27b tem sido associada a respostas inflamatórias alteradas e a comportamento metastático em modelos de câncer, tornando esse alvo útil para estudar a remodelação do microambiente impulsionada pela secreção. Reagentes para Rab27b são aplicados em pesquisas mecanísticas com células primárias de camundongo e modelos in vivo para investigar a biogênese de grânulos, a regulação de exossomos e do secretoma e fenótipos de transporte vesicular na biologia imune e tumoral.
Rab 27b O Plasmídeo de Nickase Dupla (m2) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Rab27b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Rab27b. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Rab27b. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Rab27b interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.