Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) PYK2: sc-400708-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PYK2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PYK2 (h) y el plásmido de doble nickasa PYK2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PTK2B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PYK2 Anticuerpo (E-3): sc-393181
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PYK2 | sc-400708-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) PYK2 | sc-400708-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El PTK2B humano codifica la tirosina quinasa no receptora PYK2, un nodo de señalización asociado a las adhesiones focales que se activa aguas abajo de integrinas, receptores de factores de crecimiento, receptores de quimiocinas y señales de Ca2+/PKC. PYK2 coordina cascadas de fosforilación que involucran quinasas de la familia Src, FAK, MAPK/ERK y PI3K-AKT para regular la remodelación del citoesqueleto, el recambio de adhesiones, la migración y el tráfico vesicular. También contribuye a la señalización inmunitaria innata e inflamatoria, incluidas vías vinculadas a la activación de leucocitos y a respuestas microgliales. La desregulación de la señalización PTK2B/PYK2 se ha asociado con cambios en la motilidad celular y en programas de supervivencia relevantes para la biología del cáncer, así como con vínculos genéticos y funcionales con la neuroinflamación y mecanismos de enfermedad neurodegenerativa.
PYK2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PTK2B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PTK2B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PTK2B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PTK2B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.