Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plk Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-422309-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PlkO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Plk (m) e o Plasmídeo Double Nickase Plk (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Plk1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Plk Anticorpo (F-8): sc-17783
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Plk Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-422309-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plk Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-422309-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Plk1 de camundongo codifica a quinase polo-like 1 (Plk1), uma quinase de serina/treonina que coordena transições-chave durante a mitose ao regular a maturação do centrossomo, a montagem do fuso bipolar, a segregação cromossômica e a citocinese. A atividade de Plk1 integra-se à sinalização de CDK1–ciclina B e controla múltiplos substratos mitóticos, incluindo proteínas envolvidas na função do cinetócoro e na dinâmica dos microtúbulos, para assegurar a progressão correta do ciclo celular. A expressão ou atividade desregulada de Plk1 está associada à proliferação aberrante e à instabilidade do genoma, tornando-a um alvo amplamente utilizado para estudar checkpoints mitóticos, instabilidade cromossômica e decisões de destino celular em células de mamíferos em divisão.
Plk O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Plk1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Plk1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Plk1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Plk1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.