Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
plexin-B1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401840
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- plexin-B1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico plexin-B1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: plexin-B1 Anticuerpo (A-8): sc-28372
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
plexin-B1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401840 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
PLXNB1 codifica plexina‑B1, un receptor transmembrana de paso único para semaforinas de clase 4 que coordina la remodelación del citoesqueleto y el movimiento celular direccional. Mediante su acoplamiento a módulos de señalización de pequeñas GTPasas, incluidas vías de la familia Rho y entradas relacionadas con Ras, la plexina‑B1 regula la dinámica de la actina, el recambio de adhesiones y la guía de neuritas. La actividad de la plexina‑B1 se cruza con la señalización asociada a receptores tirosina quinasa e integrinas para influir en la migración y el comportamiento invasivo en múltiples contextos celulares. La expresión o señalización desregulada de PLXNB1 se ha implicado en procesos del neurodesarrollo y en fenotipos asociados al cáncer, como motilidad alterada y potencial metastásico, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en estudios de vías.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO plexin-B1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PLXNB1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PLXNB1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PLXNB1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína plexin-B1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PLXNB1 para la investigación de la señalización de plexin-B1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de PLXNB1 críticos para la función de plexin-B1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PLXNB1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido plexin-B1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido plexin-B1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PLXNB1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR plexin-B1 (h) y el plásmido HDR plexin-B1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PLXNB1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PLXNB1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.