PKR Plásmido CRISPR/Cas9 KO (rabbit): sc-437324

Descripción general

PKR (EIF2AK2) es una quinasa de serina/treonina inducible por interferón que detecta ARN de doble cadena y coordina las defensas antivirales innatas. Tras su activación, PKR fosforila eIF2α para suprimir la traducción dependiente de cap, configurando las respuestas celulares al estrés y modulando los programas de señalización de NF-κB e IRF. La actividad de PKR influye en la apoptosis, en las salidas relacionadas con el inflamasoma y en el diálogo con las vías MAPK, conectando el reconocimiento de patógenos con un control más amplio de la expresión génica. La desregulación de la señalización de PKR se ha asociado con inflamación crónica, susceptibilidad viral y alteraciones de la proteostasis relevantes en modelos de neurodegeneración y estrés metabólico.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PKR (rabbit) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen en líneas celulares rabbit. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PKR.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en para la investigación de la señalización de PKR, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de críticos para la función de PKR
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PKR CRISPR/Cas9 KO (rabbit) y el plásmido PKR CRISPR/Cas9 KO (rabbit2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus . Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PKR (rabbit) y el plásmido HDR PKR (rabbit2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.