PITSLRE A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402476

Visão geral

CDK11B codifica a quinase dependente de ciclina PITSLRE A, uma quinase proteica de serina/treonina implicada na coordenação da progressão do ciclo celular com o controle transcricional. A PITSLRE A tem sido associada à regulação do processamento de RNA e do splicing do pré‑mRNA por meio de interações com fatores ligados à transcrição e ao spliceossomo, sustentando programas de expressão gênica necessários para a proliferação. Em células humanas em proliferação, a atividade da família CDK11 é frequentemente estudada no contexto do controle mitótico, das respostas ao estresse e da manutenção da proteostase. A desregulação de redes associadas à CDK11 foi observada em múltiplos cenários relevantes para doenças, nos quais alterações do ciclo celular e do metabolismo de RNA contribuem para fenótipos patológicos, tornando o CDK11B um ponto útil para estudos mecanísticos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PITSLRE A (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CDK11B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CDK11B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CDK11B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PITSLRE A.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CDK11B para a investigação da sinalização de PITSLRE A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CDK11B críticos para a função PITSLRE A
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CDK11B para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PITSLRE A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PITSLRE A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CDK11B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PITSLRE A Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PITSLRE A (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CDK11B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CDK11B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.