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PADI4双切口酶质粒(h) | sc-402657-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PADI4双切口酶质粒(h2) | sc-402657-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PADI4 编码肽基精氨酸脱亚氨酶 4(PAD4),这是一种钙依赖性酶,能够催化蛋白质精氨酸残基发生瓜氨酸化,从而改变蛋白电荷并调控染色质结构。PAD4 介导的组蛋白瓜氨酸化可调节转录程序,并与炎症基因表达的表观遗传调控、中性粒细胞胞外诱捕网(NET)形成以及先天免疫信号传导相互交织。PADI4 活性失调与自身免疫和慢性炎症有关;在类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮以及肿瘤相关免疫微环境中,异常的瓜氨酸化谱也常被研究。因此,PADI4 被广泛用于染色质调控、中性粒细胞生物学以及由翻译后修饰驱动的信号网络研究中。
PADI4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PADI4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PADI4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PADI4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PADI4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。