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OAZ慢病毒激活颗粒(m) | sc-430124-LAC | 200 µl | $455.00 |
Zfp423 编码转录调控因子 OAZ(亦称 ZNF423),这是一种多锌指蛋白,在小鼠中作为 DNA 结合支架,将发育信号线索整合进细胞类型特异性的基因表达程序。OAZ 参与与神经发育和脂肪细胞谱系承诺相关的转录网络,并被认为与 BMP/SMAD 等通路及其相关的、与分化有关的转录调控存在串扰。通过协调增强子与启动子的相互作用,Zfp423 有助于调控祖细胞状态转换、细胞命运决定以及多种组织中的成熟过程。因此,Zfp423/OAZ 活性失调与发育障碍、分化异常以及疾病相关的转录调控网络改变等研究密切相关。
OAZ 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Zfp423 表达。
OAZ 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Zfp423转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性OAZ表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Zfp423 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。