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NPAS4慢病毒激活颗粒(h) | sc-402373-LAC | 200 µl | $455.00 |
NPAS4(神经元 PAS 结构域蛋白 4)是一种活动依赖性的碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)PAS 转录因子,可将钙信号与神经元内快速启动的转录程序相耦联。它通过调控参与突触形成、抑制性突触缩放以及神经营养因子信号传导(包括与 BDNF 反应性转录相关的通路)等基因网络,来维持兴奋与抑制的平衡。NPAS4 与神经元可塑性、学习记忆及应激反应相关的神经环路有关;其调控异常已与多种神经精神疾病和神经退行性疾病相关表型相联系。作为一种情境敏感的转录调控因子,NPAS4 常被用于在人源神经元模型中研究刺激驱动的基因表达及环路层面的适应性变化。
NPAS4 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 NPAS4 表达。
NPAS4 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在NPAS4转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性NPAS4表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 NPAS4 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。