Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Neu1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401488
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Neu1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Neu1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Neu1 Anticuerpo (F-8): sc-166824
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Neu1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401488 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
NEU1 codifica la neuraminidasa lisosomal 1 (Neu1), una sialidasa que elimina ácidos siálicos terminales de glicoproteínas y glicolípidos para regular el catabolismo lisosomal y el recambio de receptores en la superficie celular. Neu1 actúa en conjunto con el complejo de proteína protectora/catepsina A para mantener la actividad de enzimas lisosomales e influir en el tráfico endocítico y la degradación vinculada a la autofagia. Al modular el estado de sialilación de proteínas de membrana y secretadas, Neu1 afecta la señalización inmunitaria, la adhesión y la remodelación de la matriz extracelular. La actividad desregulada de NEU1 se ha implicado en patología por almacenamiento lisosomal y en procesos más amplios como la neuroinflamación y redes de señalización asociadas a tumores, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de la homeostasis glico-lisosomal.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Neu1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NEU1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NEU1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NEU1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Neu1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NEU1 para la investigación de la señalización de Neu1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de NEU1 críticos para la función de Neu1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NEU1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Neu1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Neu1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NEU1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Neu1 (h) y el plásmido HDR Neu1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NEU1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NEU1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.