NEDD8慢病毒激活颗粒(h): sc-417924-LAC

NEDD8 编码神经前体细胞表达的发育性下调蛋白 8（neural precursor cell expressed developmentally downregulated protein 8），是一种泛素样修饰因子，可通过 NEDD8 化（neddylation）级联反应（E1：NAE1/UBA3；E2：UBE2M/UBE2F；以及 E3 连接酶）与靶蛋白发生共轭。NEDD8 共轭是 Cullin-RING 泛素连接酶（CRL）的核心调控因子，可促进对调控细胞周期进程、DNA 复制、应激反应与信号转导等蛋白的泛素依赖性周转。通过精细调节蛋白稳态（proteostasis）与检查点控制，NEDD8 影响与基因组稳定性和炎症信号相关的通路。NEDD8 化失调与多种疾病相关细胞状态中观察到的增殖程序改变及异常蛋白降解网络有关。

NEDD8 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 NEDD8 表达。

NEDD8 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在NEDD8转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性NEDD8表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 NEDD8 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。