NDUFS1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-416401-LAC

NDUFS1 kodiert eine essenzielle Kernuntereinheit des mitochondrialen Komplexes I (NADH:Ubiquinon-Oxidoreduktase), der die oxidative Phosphorylierung unterstützt, indem er Elektronen von NADH auf Ubiquinon überträgt und zum Protonentransport über die innere Mitochondrienmembran beiträgt. Über seine Rolle in der Elektronentransportkette beeinflusst NDUFS1 die zelluläre ATP-Produktion, die Aufrechterhaltung des mitochondrialen Membranpotentials und die Redox-Homöostase, mit nachgeschalteten Effekten auf die Signalgebung reaktiver Sauerstoffspezies und die metabolische Anpassung. Eine Störung der Komplex-I-Funktion ist mit Phänotypen mitochondrialer Dysfunktion verbunden, die energieintensive Gewebe beeinträchtigen und die Anfälligkeit für oxidativen Stress modulieren können. Als nukleär kodiertes mitochondriales Gen wird NDUFS1 in der Bioenergetik, der mitochondrialen Qualitätskontrolle und in krankheitsrelevanten Modellen einer Beeinträchtigung der Atmungskette umfassend untersucht.

NDUFS1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente NDUFS1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

NDUFS1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der NDUFS1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen NDUFS1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen NDUFS1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.