Plásmido Doble Nickase (m) MMP-13: sc-421670-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)MMP-13 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MMP-13 (m) y el plásmido de doble nickasa MMP-13 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Mmp13. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) MMP-13 | sc-421670-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) MMP-13 | sc-421670-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La metaloproteinasa de matriz 13 (MMP-13), codificada por el gen murino *Mmp13*, es una endopeptidasa secretada dependiente de zinc que escinde preferentemente colágenos fibrilares y otros sustratos de la matriz extracelular (MEC) para regular la remodelación tisular. Su expresión es inducida por citocinas inflamatorias y por la señalización de factores de crecimiento, e interactúa con programas transcripcionales vinculados a MAPK/AP-1 y NF-κB que coordinan el recambio de la MEC y la proteólisis pericelular. La actividad de MMP-13 contribuye a la dinámica de la matriz del cartílago y del hueso, al acoplamiento osteoclasto–osteoblasto y a los procesos de reparación de heridas mediante la modulación de la degradación del colágeno y de señales posteriores derivadas de la matriz. La desregulación de *Mmp13* se estudia con frecuencia en la degeneración musculoesquelética, la remodelación tisular inflamatoria y las interacciones tumor–estroma, donde los cambios en la composición de la MEC influyen en la migración e invasión celulares.
MMP-13 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Mmp13 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Mmp13. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Mmp13. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Mmp13 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.