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Mfn2/Mitofusin 2双切口酶质粒(h) | sc-400536-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mfn2/Mitofusin 2双切口酶质粒(h2) | sc-400536-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MFN2 编码线粒体外膜 GTP 酶 Mitofusin 2(Mfn2),它是线粒体融合与网络重塑的核心介导因子,有助于维持线粒体 DNA 完整性、膜电位以及氧化磷酸化能力。除融合功能外,Mfn2 还参与内质网–线粒体接触位点(MAMs)的形成与维持,从而影响 Ca²⁺ 转运、脂质交换以及应激信号通路,这些通路共同协调细胞代谢与凋亡。MFN2 的活性与线粒体自噬(mitophagy)和整合应激反应等线粒体质量控制程序相互交织,将细胞器动态变化与生物能量适应联系起来。MFN2 功能失调与神经退行性病变和周围神经病变有关,并且常在心脏代谢功能障碍相关研究中被重点关注,因为此类情境下线粒体形态与信号改变常伴随细胞应激。
Mfn2/Mitofusin 2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MFN2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MFN2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MFN2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MFN2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。