Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) MCM7: sc-400900-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)MCM7 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MCM7 (h) y el plásmido de doble nickasa MCM7 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MCM7. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MCM7 Anticuerpo (141.2): sc-9966
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) MCM7 | sc-400900-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) MCM7 | sc-400900-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MCM7 codifica una subunidad central de la helicasa de mantenimiento de minicromosomas (MCM2–7), que autoriza los orígenes de replicación e impulsa el desenrollamiento del ADN durante la fase S. Como parte del complejo de prerreplicación, MCM7 se coordina con CDC45 y GINS para sostener la progresión de la horquilla de replicación, la estabilidad del genoma y las respuestas de los puntos de control del ciclo celular. La expresión desregulada de MCM7 o de la autorización de la replicación contribuye al estrés replicativo, a la proliferación aberrante y a la inestabilidad cromosómica observadas en múltiples tipos de tumores. MCM7 también se estudia en contextos de tolerancia al daño del ADN y de proteostasis de los factores de replicación durante el estrés inducido por oncogenes.
MCM7 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MCM7 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MCM7. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MCM7. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MCM7 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.