Plasmide Double Nickase (m) LRP1: sc-421464-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) LRP1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LRP1 Double Nickase (m) et le plasmide LRP1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Lrp1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LRP1 Antibody (8G1): sc-57353
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) LRP1 | sc-421464-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) LRP1 | sc-421464-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La protéine 1 apparentée au récepteur des lipoprotéines de faible densité (LRP1), codée par le gène murin *Lrp1*, est un récepteur endocytaire et de signalisation multifonctionnel qui coordonne l’internalisation de ligands variés, notamment des lipoprotéines, des complexes protéase–inhibiteur et des composants de la matrice extracellulaire. Grâce à ses interactions avec des protéines adaptatrices et des co‑récepteurs, LRP1 influence l’endocytose médiée par la clathrine, le remodelage du cytosquelette et des voies de transduction du signal telles que PI3K–AKT et MAPK, modulant ainsi la migration et la survie cellulaires. *Lrp1* module également la protéolyse extracellulaire en régulant uPA/uPAR et l’activité des métalloprotéinases matricielles, reliant le trafic du récepteur au remodelage tissulaire. Une fonction dérégulée de LRP1 a été associée à des phénomènes en neurobiologie, à des phénotypes vasculaires et métaboliques, ainsi qu’à des processus du microenvironnement tumoral, ce qui en fait un nœud largement étudié des réseaux d’élimination homéostatique et de signalisation cellulaire.
LRP1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Lrp1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Lrp1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Lrp1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Lrp1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.