Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
LPP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406769
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LPP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LPP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LPP Anticorpo (8B3A11): sc-101434
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LPP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406769 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
LPP (lipoma‑preferred partner) codifica uma proteína adaptadora contendo domínios LIM que se localiza em adesões focais e em junções célula–célula, onde acopla a tensão do citoesqueleto a respostas transcricionais. Por meio de interações com proteínas associadas à actina e com hubs de sinalização, o LPP contribui para a dinâmica de adesão ligada a integrinas, para a mecanotransdução e para a regulação de programas de migração e invasão celular. Também está implicado no transporte nucleo‑citoplasmático e na modulação da expressão gênica a jusante de vias dependentes de adesão. Alterações na expressão ou rearranjos de LPP foram relatados em contextos que incluem tumores mesenquimais e progressão metastática, sustentando sua utilidade como alvo para o estudo de fenótipos oncogênicos regulados por adesão.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LPP (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene LPP em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do LPP, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do LPP na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LPP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de LPP para a investigação da sinalização de LPP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) LPP críticos para a função LPP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos LPP para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LPP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LPP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus LPP. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LPP Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LPP (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia LPP para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo LPP definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.