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LPCAT1双切口酶质粒(h) | sc-413287-NIC | 20 µg | $410.00 |
LPCAT1(溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1)是一种与内质网(ER)相关的酰基转移酶,可催化溶血磷脂酰胆碱再酰化生成磷脂酰胆碱,从而在 Lands 循环中支持膜生物发生以及磷脂重塑。通过塑造磷脂酰胆碱分子种类的组成,LPCAT1 会影响膜曲率、囊泡运输和脂质依赖性信号传导,并在特定上皮细胞环境中参与表面活性物质磷脂的生成。LPCAT1 表达或活性异常与脂质代谢程序失调有关,并在肿瘤进展模型及炎症微环境研究中受到关注,因为这些情境下膜合成与重塑往往增强。作为甘油磷脂代谢网络中的一个节点,LPCAT1 常被用于研究其对细胞应激反应、增殖以及代谢适应的影响。
LPCAT1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LPCAT1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LPCAT1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LPCAT1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LPCAT1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。