Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) KV1.3: sc-403814-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)KV1.3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa KV1.3 (h) y el plásmido de doble nickasa KV1.3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a KCNA3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: KV1.3 Anticuerpo (G-9): sc-398855
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) KV1.3 | sc-403814-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) KV1.3 | sc-403814-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KCNA3 codifica el canal humano de potasio dependiente de voltaje Kv1.3, una conductancia de la membrana plasmática que ayuda a establecer el potencial de membrana en reposo y a regular la repolarización del potencial de acción en células excitables y no excitables. La actividad de Kv1.3 modula la señalización de Ca2+ al controlar la polarización de la membrana, influyendo así en vías vinculadas a programas transcripcionales inducidos por activación, la proliferación y la apoptosis en células inmunitarias y otros tipos celulares. El canal participa en procesos de señalización eléctrica y de homeostasis iónica que repercuten en el metabolismo celular y en las respuestas al estrés. La disfunción de KCNA3/Kv1.3 se ha estudiado en el contexto de la inflamación mediada por el sistema inmunitario y de cambios en la excitabilidad, lo que respalda su relevancia en los mecanismos subyacentes a fenotipos neurológicos e inmunológicos.
KV1.3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus KCNA3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de KCNA3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de KCNA3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con KCNA3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.