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KV1.3双切口酶质粒(h) | sc-403814-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KV1.3双切口酶质粒(h2) | sc-403814-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KCNA3 编码人类电压门控钾通道 Kv1.3。Kv1.3 是一种位于质膜的离子通道电导,有助于设定静息膜电位,并在兴奋性与非兴奋性细胞中调控动作电位复极化。Kv1.3 通过控制膜极化来塑造 Ca²⁺ 信号,从而影响与激活诱导的转录程序、增殖和凋亡相关的通路,涉及免疫细胞及其他细胞类型。该通道参与电信号传导与离子稳态过程,进而影响细胞代谢与应激反应。KCNA3/Kv1.3 功能失调已在免疫介导的炎症和细胞兴奋性改变等背景中得到研究,提示其与神经与免疫相关表型的潜在机制具有相关性。
KV1.3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 KCNA3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对KCNA3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏KCNA3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了KCNA3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。