Plásmido Doble Nickase (h) KLF6: sc-400888-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)KLF6 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa KLF6 (h) y el plásmido de doble nickasa KLF6 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a KLF6. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: KLF6 Anticuerpo (E-10): sc-365633
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) KLF6 | sc-400888-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) KLF6 | sc-400888-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KLF6 (factor 6 similar a Krüppel) codifica un factor de transcripción con dedos de zinc que se une a elementos promotores ricos en GC para regular genes que controlan la progresión del ciclo celular, la diferenciación y las respuestas al estrés celular. Participa en programas transcripcionales que se cruzan con puntos de control dependientes de p53 y con la señalización asociada a TGF-β, modulando de forma dependiente del contexto el control de la proliferación y la apoptosis. La alteración de la actividad o la expresión de KLF6 se ha vinculado con una regulación del crecimiento perturbada y con fenotipos asociados a la inflamación, lo que lo convierte en un nodo relevante para estudiar la desregulación transcripcional en la biología de las enfermedades humanas. En investigación biomédica, KLF6 se estudia con frecuencia por sus funciones similares a las de un supresor tumoral, su papel en la remodelación tisular y la estabilidad de las redes de regulación génica.
KLF6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus KLF6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de KLF6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de KLF6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con KLF6 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.