Keratin 32 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-410857

개요

KRT32는 케라틴 32를 암호화하며, 케라틴 32는 제I형 모발 케라틴으로서 제II형 케라틴과 함께 중합해 모발 섬유의 구조적 완전성과 기계적 탄성을 유지하는 데 필수적인 중간섬유를 형성합니다. 케라틴 세포골격의 구성 요소로서 KRT32는 세포골격 조직화, 모낭 계통에서의 상피 분화 프로그램, 그리고 각질화 구조의 조립에 기여합니다. 모발 케라틴 네트워크의 발현 변화 또는 붕괴는 모발 축의 취약성(쉽게 부러짐)과 연관되며, 케라틴 필라멘트 조립 역학을 연구하기 위한 추적 가능한 지표를 제공합니다. 따라서 KRT32는 모발 생물학 및 각질화 과정에서 세포골격 스트레스 반응, 케라틴 필라멘트의 턴오버, 유전형–표현형 관계를 규명하는 연구에 중요합니다.

Keratin 32 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 KRT32 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 KRT32 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 KRT32의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Keratin 32 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Keratin 32 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 KRT32 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Keratin 32 기능에 중요한 KRT32 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 KRT32 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Keratin 32 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Keratin 32 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 KRT32 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Keratin 32 HDR 플라스미드 (h) 및 Keratin 32 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 KRT32 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 KRT32 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.