JMJD4 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406639

개요

JMJD4는 JmjC 도메인을 포함하는 2-옥소글루타레이트(2-oxoglutarate) 의존성 산소화효소를 암호화하며, 단백질의 안정성과 기능에 영향을 줄 수 있는 번역 후 하이드록실화 반응에 관여하는 것으로 알려져 있습니다. JMJD4의 활성은 리보솜 및 RNA 결합 인자들을 변형함으로써 번역 관련 과정의 조절과 연관되어 있으며, 그 결과 단백질 항상성(proteostasis)과 세포 스트레스 반응에 하위 효과를 미칩니다. 산소화효소의 화학 반응을 유전자 발현 조절과 연결한다는 점에서, JMJD4는 대사 감지, 저산소증 관련 신호전달, 그리고 번역 기계의 적응적 재구성에 관여하는 경로에서 연구되고 있습니다. 이러한 과정의 조절 이상은 증식성 상태 및 스트레스에 적응한 상태와 관련이 있어, JMJD4는 암 생물학과 관련된 전사/번역 조절 프로그램에서 기전 연구를 위한 유용한 표적으로 여겨집니다.

JMJD4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 JMJD4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 JMJD4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 JMJD4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 JMJD4 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 JMJD4 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 JMJD4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• JMJD4 기능에 중요한 JMJD4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 JMJD4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• JMJD4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 JMJD4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 JMJD4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  JMJD4 HDR 플라스미드 (h) 및 JMJD4 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 JMJD4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 JMJD4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.