ITI-H1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403720-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ITI-H1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ITI-H1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ITI-H1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ITIH1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ITI-H1 Anticorpo (F-5): sc-514541
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ITI-H1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403720-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ITI-H1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403720-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITIH1 codifica a cadeia pesada 1 do inibidor inter-α-tripsina (ITI-H1), uma glicoproteína secretada de origem hepática que contribui para a organização da matriz extracelular por meio de ligação covalente ao hialuronano via o complexo inter-α-inibidor que contém bikunina. Essa atividade influencia a estabilidade da matriz pericelular, as interações célula–matriz e os microambientes inflamatórios ao modular processos dependentes de hialuronano. A ITI-H1 é frequentemente estudada no contexto da biologia da fase aguda, da regulação de proteases no espaço extracelular e do remodelamento de matrizes estromais. Alterações na expressão de ITIH1 ou variações genéticas foram relatadas em diferentes contextos inflamatórios e fibróticos e em estudos de microambiente associados à oncologia, sustentando sua utilidade como alvo em biologia da matriz e em associações com doenças em modelos humanos.
ITI-H1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ITIH1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ITIH1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ITIH1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ITIH1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.