Plasmide Double Nickase (m) INSR/Insulin Receptor: sc-421142-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) INSR/Insulin Receptor correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide INSR/Insulin Receptor Double Nickase (m) et le plasmide INSR/Insulin Receptor Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Insr. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: INSR/Insulin Receptor β Antibody (CT-3): sc-57342
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) INSR/Insulin Receptor | sc-421142-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) INSR/Insulin Receptor | sc-421142-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Insr code le récepteur de l’insuline murin (INSR), une tyrosine kinase réceptrice qui se lie à l’insuline pour initier la signalisation via les protéines adaptatrices IRS et, en aval, les cascades PI3K–AKT et RAS–MAPK. Ces voies coordonnent la captation du glucose, le métabolisme du glycogène et des lipides, la synthèse protéique et la survie cellulaire, tout en interagissant avec des réseaux de détection des nutriments tels que mTOR. L’activité d’INSR influence la sensibilité à l’insuline dans des tissus métaboliques comme le foie, le muscle et le tissu adipeux, et elle façonne les réponses cellulaires aux signaux hormonaux et nutritionnels. Une signalisation Insr dérégulée est largement utilisée comme point d’entrée mécanistique pour étudier la résistance à l’insuline, l’homéostasie métabolique et les phénotypes endocrino-métaboliques dans des modèles murins et des systèmes cellulaires.
INSR/Insulin Receptor Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Insr dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Insr. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Insr. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Insr.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.