Particules Lentivirales d'Activation (h) IL-8RB: sc-401404-LAC

CXCR2 code le récepteur bêta de l’interleukine‑8 (IL‑8RB), un RCPG (GPCR) de classe A qui se lie à des chimiokines CXC ELR+ telles que CXCL8/IL‑8 afin de coordonner la chimiotaxie et l’activation des leucocytes. Après liaison du ligand, IL‑8RB transmet le signal via des voies dépendantes de Gαi pour réguler PI3K–AKT, PLCβ–flux de Ca²⁺, les cascades MAPK/ERK, ainsi que l’internalisation du récepteur médiée par les β‑arrestines, modulant le trafic inflammatoire et les fonctions effectrices des neutrophiles. L’activité de CXCR2 s’entrecroise avec des programmes cytokiniques et NF‑κB et influence les interactions endothéliales, les signaux angiogéniques et le remodelage au sein des tissus inflammés. Une signalisation CXCR2 dérégulée est impliquée dans des états inflammatoires chroniques et l’inflammation associée aux tumeurs, ce qui soutient des études mécanistiques sur le recrutement des cellules immunitaires et la signalisation du microenvironnement.

Les particules d'activation lentivirales IL-8RB (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de CXCR2 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales IL-8RB (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription CXCR2, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de IL-8RB. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif CXCR2 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.