Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HMG-1/HMGB1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420871-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HMG-1/HMGB1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HMG-1/HMGB1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase HMG-1/HMGB1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Hmgb1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HMG-1/HMGB1 Anticorpo (HAP46.5): sc-56698
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HMG-1/HMGB1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420871-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HMG-1/HMGB1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-420871-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Hmgb1 de camundongo codifica a proteína associada à cromatina HMG-1/HMGB1, um fator arquitetural de ligação ao DNA que curva e estabiliza complexos nucleoproteicos para modular a transcrição, a replicação, a recombinação e o reparo do DNA. A HMGB1 participa do remodelamento da cromatina e de vias de resposta a danos, incluindo a coordenação do reparo por excisão de bases e da sinalização de reparo de quebras de dupla fita, e também pode influenciar a sinalização inflamatória quando é liberada no meio extracelular. A atividade desregulada da HMGB1 tem sido associada a respostas aberrantes de citocinas, neuroinflamação e biologia tumoral, o que a torna um alvo frequente em estudos de imunidade inata, respostas ao estresse e manutenção do genoma. Em modelos murinos, a perturbação de Hmgb1 é usada para investigar programas de morte celular, inflamação estéril e controle transcricional em contextos relevantes para desenvolvimento e doença.
HMG-1/HMGB1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Hmgb1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Hmgb1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Hmgb1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Hmgb1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.