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Histone H10双切口酶质粒(h) | sc-403716-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Histone H10双切口酶质粒(h2) | sc-403716-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
H1F0 编码一种不依赖复制的连接组蛋白变体——组蛋白 H10。它与核小体进入/退出处的 DNA 结合,以稳定更高阶的染色质结构并调节基因组可及性。H10 的积累通常与细胞分化及增殖潜能降低相关,这反映了其在染色质致密化、转录调控以及表观遗传状态维持中的作用。通过调节核小体间距和染色质的物理性质,组蛋白 H10 影响包括 DNA 复制时序、DNA 损伤应答以及全局基因表达程序在内的多种过程。在肿瘤生物学与谱系决定等不同情境中,已有关于 H1F0 表达与染色质组织改变的报道,这也支持其作为研究表观遗传失调的标志物与机制节点的价值。
Histone H10 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 H1F0 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对H1F0内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏H1F0的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了H1F0基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。